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轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b定量檢測法

發(fā)布時間: 2022-12-08  點擊次數(shù): 690次

轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b僅用于食品和飼料中轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆的鑒定和定量方法的校準(zhǔn)或質(zhì)量控制。干的CRM粉具有吸濕性。

轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b是五種DAS-44406-6大豆粉末認(rèn)證參考物質(zhì)(CRMs)之一,含有不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的轉(zhuǎn)基因大豆。ERM-BF436b是由陶氏農(nóng)業(yè)科學(xué)公司(DAS,Oxon,UK)提供的轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆的全種子生產(chǎn)而成。


熒光PCR和數(shù)字PCR法檢測轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6品系大豆:

目的:建立實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)檢測轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6品系大豆的定性檢測方法和使用數(shù)字PCR檢測轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6品系大豆的定量檢測方法。

方法:針對轉(zhuǎn)基因DAS- 44406-6大豆品系,進(jìn)行5’-RACE,測定該品系轉(zhuǎn)基因大豆外源片段與大豆染色體重組的邊界序列,并根據(jù)該邊界 序列設(shè)計引物和探針。使用23 種非DAS-44406-6品系轉(zhuǎn)基因植物作為陰性對照測試實時熒光PCR引物和探針的特異 性,以DAS-44406-6品系樣品制備6 個含量梯度的樣品進(jìn)行檢測低限實驗。使用數(shù)字PCR技術(shù)進(jìn)行定量檢測,并確 定定量檢測的低限。

結(jié)果:建立的轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆品系的實時熒光PCR特異性檢測方法品系鑒定特異性較 強(qiáng),實時熒光PCR檢測方法的檢測低限在模板DNA濃度為100 ng/反應(yīng)時,為0.01%的轉(zhuǎn)基因大豆含量,約為16.6 個 拷貝的DAS-44406-6基因組DNA;數(shù)字PCR檢測方法的檢測低限在模板DNA濃度為0.5 ng/反應(yīng)、轉(zhuǎn)基因大豆含量為 1%時,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.7%。因此,建立的轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆品系實時熒光PCR和數(shù)字PCR特異性檢測方法 符合轉(zhuǎn)基因檢測的要求。

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東莞市百順生物科技有限公司是BCR/IRMM/ERM的代理商,專業(yè)代理 轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b標(biāo)準(zhǔn)品。


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